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本试剂盒可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液等样品中尿素含量，尿液样品可直接检测，无需处理。

在酸性条件下加热一定时间，尿素与二乙酰缩合，生成红色二嗪(diazine)，该反应被称为Fearon反应，颜色深浅与尿素含量呈正比，通过分光光度比色法(酶标仪)测定540nm处吸光度。

尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide)，是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物，也是目前含氮量最高的氮肥；尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法，后者被认为是间接方法，先经尿素酶分解尿素为铵离子，然后根据波氏反应，检测铵离子的生成量。

• 二乙酰一肟比色法线性范围为14mmol/L，如果浓度较高，需用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
  
• 一般显色后应立即检测，否则会有轻度褪色。
  
• 尿液样品中一般尿素含量较高，样品需用1∶50稀释，如果显色后吸光度仍超过本法的线性范围，还需将稀释尿液，再行稀释重新检测。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 准备样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存。尿液中尿素含量较高，应先用蒸馏水作1∶50稀释后再测。
  
• 配制标准品工作液：取适量的尿素标准(100mmol/L)，按尿素标准(100mmol/L)∶尿素标准稀释液=1∶19的比例混合，使浓度达到5mmol/L，即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L)；4℃保存，1周有效。
  
• Urea加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的Urea浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
  

  加入物(ml)	空白管	标准管	测定管
  尿素标准稀释液	0.01	—	—
  尿素标准(5mmol/L)	—	0.01	—
  待测样品	—	—	0.01
  Diazine显色液	0.25	0.25	0.25
  Urea Assay Buffer	2.5	2.5	2.5

• Urea检测：充分混匀，沸水水浴12min，置于冷水中冷却5min，分光光度计检测540nm处吸光度，比色杯光径1cm，空白管调零，读取各标准管、测定管的吸光度(分别为A _标准、A _测定)。
  
  血清尿素(mmol/L)=(A_测定/A_标准)×5mmol/L
  
  
  血清尿素氮(mg/L)=尿素(mmol/L)×28